STN P ISO/TS 12869
| Označenie: | STN P ISO/TS 12869 |
| Platnosť: | Platná |
| Počet strán: | 48 |
| Jazyk: |
SK
|
| Listinná verzia: | 18,90€ |
| Elektronická verzia: |
a) Bez možnosti tlače, prenosu textu a obrázkov:
17,01€ b) Bez možnosti tlače, s prenosom textu a obrázkov: 18,90€ c) S možnosťou tlače, prenosu textu a obrázkov: 24,57€ |
| Slovenský názov: | Kvalita vody. Detekcia a kvantifikácia Legionella spp. a/alebo Legionella pneumophila metódou koncentrovania a génovej amplifikácie s použitím kvantitatívnej polymerázovej reťazovej reakcie (qPCR) |
| Anglický názov: | Water quality. Detection and quantification of Legionella spp. and/or Legionella pneumophila by concentration and genic amplification by quantitative polymerase chain reaction (qPCR) |
| Dátum vydania: | 01. 04. 2021 |
| Dátum zrušenia: | |
| ICS: | 07.100.20 |
| Triediaci znak: | 75 7855 |
| Úroveň zapracovania: | idt ISO/TS 12869:2019 |
| Vestník: | 03/21 |
| Zmeny: | |
| Nahradzujúce normy: | |
| Nahradené normy: | STN P ISO/TS 12869:2014-08 (75 7855) |
| Poznámka vo Vestníku: | |
| Predmet normy: | Tento dokument opisuje metódu detekcie a kvantifikácie Legionella spp. a L. pneumophila pomocou kvantitatívnej polymerázovej reťazovej reakcie (qPCR). Špecifikuje všeobecné metodologické požiadavky, požiadavky na pracovné charakteristiky a požiadavky na kontrolu kvality. Technické podrobnosti sa v tomto dokumente uvádzajú len na informáciu. Všetky technické riešenia, ktoré spĺňajú uvedené požiadavky na pracovné charakteristiky, sú vyhovujúce.Tento dokument je určený na bakteriologickú analýzu všetkých typov vôd (teplej aj studenej vody, vody z chladiacich veží atď.), ak charakter a/alebo množstvo suspendovaných látok a/alebo sprievodnej flóry neovplyvňuje detekciu. Tieto interferencie môžu negatívne ovplyvniť detekčný aj kvantifikačný limit. Výsledky sa vyjadrujú ako počet genómových jednotiek Legionella spp. a/alebo L. pneumophila na liter vzorky. Metóda opísaná v tomto dokumente je použiteľná na všetky typy vôd. Metódy qPCR neposkytujú informácie o fyziologickom stave legionel. |
| Náhľad normy: | Náhľad normy (PDF) |
| Obsah: |
Predhovor 6 Úvod 7 1 Predmet normy 8 2 Normatívne odkazy 8 3 Termíny, definície, symboly a skratky 8 3.1 Termíny a definície 8 3.2 Symboly a skratky 10 4 Podstata 10 5 Odber vzoriek 10 6 Všeobecné skúšobné podmienky 11 6.1 Všeobecne 11 6.2 Pracovníci 11 6.3 Priestory 11 6.4 Prístroje a spotrebný materiál (okrem činidiel) 12 6.4.1 Prístroje 12 6.4.2 Spotrebný materiál 12 6.4.3 Koncentrovanie 12 6.4.4 Extrakcia a PCR (detekcia a kvantifikácia) 12 6.5 Činidlá 12 6.5.1 Všeobecne 12 6.5.2 Činidlá PCR 13 6.5.3 Iné činidlá 13 6.6 Dekontaminácia zariadení a priestorov 14 6.7 Nakladanie s odpadom a jeho zneškodňovanie 14 7 Postup 14 7.1 Koncentrovanie 14 7.2 Extrakcia DNA 14 7.2.1 Všeobecne 14 7.2.2 Postupy 14 7.2.3 Stabilita extraktov DNA 14 7.3 Amplifikácia DNA použitím PCR 15 7.3.1 Všeobecne 15 7.3.2 Cieľové sekvencie, priméry a sondy 15 7.3.3 Príprava amplifikačnej zmesi 17 7.4 Kvantitatívna detekcia 17 7.4.1 Všeobecne 17 7.4.2 PCR protokol 18 7.5 Kvalitatívna detekcia 19 8 Vyjadrenie výsledkov 19 9 Technický postup charakterizácie a validácie metódy 21 9.1 Všeobecne 21 9.2 Inkluzivita a exkluzivita sond a primérov 21 9.3 Overenie kalibračnej funkcie kvantitatívnej fázy PCR 22 9.3.1 Všeobecne 22 9.3.2 Princíp overenia kalibračnej krivky 22 9.3.3 Postup hodnotenia kalibračnej krivky 22 9.3.4 Analýza výsledkov 23 9.3.5 Použitie kalibračnej krivky 26 9.4 Overenie kvantifikačného limitu PCR, LQqPCR 26 9.4.1 Podstata 26 9.4.2 Priebeh experimentu 26 9.4.3 Analýza výsledkov 26 9.4.4 Teoretický kvantifikačný limit celej metódy 28 9.5 Overenie detekčného limitu PCR (LDqPCR) 28 9.6 Výťažnosť metódy 28 9.6.1 Podstata 28 9.6.2 Postup 28 9.6.3 Výpočty 29 9.7 Robustnosť 29 9.8 Neistota celej metódy merania 29 10 Kontrola kvality 30 10.1 Všeobecne 30 10.2 Nadväznosť kalibračného roztoku a referenčného materiálu na primárny štandard 30 10.2.1 Podstata 30 10.2.2 Postup 31 10.2.3 Analýza údajov 31 10.3 Monitorovanie pracovných charakteristík 32 10.3.1 Pracovné charakteristiky kalibrácie 32 10.3.2 Monitorovanie pracovných charakteristík na úrovni kvantifikačného limitu 33 10.4 Pozitívna a negatívna kontrola metódy 33 10.5 Kontrola bez templátu 33 10.6 Kontrola inhibície 33 10.6.1 Všeobecne 33 10.6.2 Kontrola inhibície s použitím cieľového úseku DNA 33 10.6.3 Kontrola inhibície s použitím plazmidu alebo oligonukleotidu 34 11 Protokol o skúške 35 Príloha A (informatívna) – Príklad postupu prípravy kvantitatívneho štandardného roztoku DNA 36 Príloha B (informatívna) – Príklad metódy stanovenia prahového cyklu 37 Príloha C (informatívna) – Príklad štúdie kalibračnej funkcie kvantitatívnej PCR 38 Príloha D (informatívna) – Špecifické Studentovo rozdelenie 41 Príloha E (informatívna) – Príklad hodnotenia výťažnosti 42 Príloha F (informatívna) – Príklad hodnotenia celkovej neistoty 43 Príloha G (normatívna) – Hodnotenie pracovných charakteristík metódy validovanej treťou stranou 44 Príloha H (informatívna) – Medzilaboratórne štúdie 45 Literatúra 48 |